大肠杆菌蛋白表达

大肠杆菌蛋白表达

目前应用最广泛,也是最经济实惠的蛋白表达系统。E. coli具有遗传背景清楚、细胞增殖快、表达量高、稳定性好和抗污染能力强等特点,适用于多种属蛋白的表达,尤其对小分子蛋白的生产具有极大的优势,但也存在一些问题,如易形成包涵体和含有内毒素等。

艾贝克提供从密码子优化到重组蛋白表达/纯化的一站式服务以及内毒素去除等附加服务,以满足不同的定制需求。我们拥有丰富的E. coli 可溶性蛋白表达/纯化及蛋白复性经验,拥有多种E. coli细胞株和表达载体,可为客户提供优质的原核蛋白表达服务。

我们的优势

高表达水平

提供大量蛋白质产物

简单和经济

培养和维护成本较低

多样化的宿主菌株

适用于不同表达需求


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服务内容

大肠杆菌蛋白表达服务内容客户需提供的信息
实验周期
交付产品

基因合成及密码子优化(可选)


客户提供目的蛋白的序列信息或质粒


分析并调取基因信号肽,跨膜区


载体构建

▸▸克隆至合适的表达载体

▸▸质粒测序

▸▸质粒制备

▸▸交付内容:测序报告 (若客户要求)


转化,诱导


纯化蛋白

蛋白信息:分子大小;氨基酸序列;用何种标签;后续用途或实验目的;需要的蛋白量
基因信息:基因名称;基因序列;种属来源

表达水平:客户是否有质粒,之前是否做过预实验以及预实验

结果如何:蛋白表达部位(胞膜、胞浆、胞核);是否形成包涵体

基因合成:2-3周
亚克隆:1周

小试:1-2周

表达纯化:2-3周

整个服务流程需要8-10周

质粒

含目的基因的质粒

阳性表达菌株

蛋白(一般为1-3mg,80%纯度,具体视小试结果而定)

实验报告


服务案例


大肠杆菌蛋白表达服务案例

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1:诱导后沉淀

2:诱导后上清

3:上柱流出

4:洗杂

5-6:洗脱目的蛋白

7:SDS-PAGE Protein marker