酵母表达系统

酵母表达系统

酵母是一种单细胞低等真核生物,培养条件普通,生长繁殖速度迅速,能够耐受较高的流体静压,用于表达基因工程产品时,可以大规模生产,有效降低了生产成本。

酵母蛋白表达系统主要基于酵母菌细胞,常用的是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和毕赤酵母(Pichia pastoris)。这两种酵母系统均以真核细胞为基础,具备对复杂蛋白的正确折叠和修饰能力。

我们的优势

高表达水平

比大肠表达系统高

高产量和可扩展性

实现大规模生产

应用广泛

蛋白质研究和应用


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服务内容


大肠杆菌蛋白表达服务内容客户需提供的信息实验周期交付产品

表达载体构建

密码子优化全基因合成

▸▸PCR扩增产物酶切连接到pPic9k,pPic3.5k,pPiczαA等载体上

▸▸转化TOP10宿主

▸▸获得测序正确的重组质粒


转化及菌株鉴定

▸▸重组质粒大量制备

▸▸线性化重组质粒

▸▸电击转化

▸▸阳性克隆子筛选(PCR法)

▸▸高拷贝菌株筛选(可选)


小试及放大表达纯化

▸▸小试表达筛选

▸▸定株,优化表达条件

▸▸放大培养2-5升

▸▸表达上清液浓缩

▸▸通过亲和、离子交换、疏水及分子筛等多种层析方法纯化目的蛋白 PAGE分析纯化过程

▸▸WB鉴定纯化后蛋白

表达体系系统选择(客户提供表达菌株的略过此步骤,仅提供表达质粒的可选择需要电转化的表达菌株)

表达载体构建:3-4周

转化及菌株鉴定:1-2周

小试及放大表达纯化:3-4周

整个服务流程需要:10-12周

基因合成报告

测序验证报告

包含表达质粒的大肠杆菌DH5a

表达质粒

线性化检测图片

阳性表达菌株

PCR鉴定阳性菌株图

高拷贝阳性菌株(可选)

小试表达流程报告

小试表达总结

蛋白纯化流程报告

蛋白纯化原始图片

发货蛋白

Western Blot(标签抗体)






服务案例