高效表达载体
从密码子优化到蛋白表达
上千个表达项目
| 大肠杆菌蛋白表达服务内容 | 客户需提供的信息 | 实验周期 | 交付产品 |
|---|---|---|---|
▸表达体系系统选择： ▸▸可选表达载体 ▸▸其他商业化的载体 ▸表达细胞选择 ▸转染试剂选择 ▸表达载体构建： ▸▸密码子优化全基因合成 ▸▸PCR扩增产物酶切连接到pSec系列、pCMV系列、pCDNA等系列载体上 ▸▸转化TOP10宿主 ▸▸获得测序正确的重组质粒 ▸▸无内毒素质粒大量制备 ▸瞬时转染小试表达与纯化： ▸▸小体积瞬时转染HEK293/CHO等细胞 ▸▸检测表达产物 ▸▸扩大培养细胞并转染 ▸▸通过亲和、离子交换、疏水及分子筛等多种层析方法纯化目的蛋白 ▸▸重组蛋白鉴定检测 ▸放大培养及蛋白纯化（可选）： ▸▸放大培养（根据具体需求量） ▸▸Ni柱亲和纯化 ▸▸纯度鉴定（PAGE） ▸▸蛋白分装发货 | ▸蛋白信息：分子大小；氨基酸序列；用何种标签；后续用途或实验目的；需要的蛋白量 ▸表达水平：客户是否有质粒，之前是否做过预实验以及预实验 ▸结果如何：蛋白表达部位（胞膜、胞浆、胞核）；是否形成包涵体 | ▸基因合成：2-3周 ▸小试：1-2周 ▸表达纯化：2-3周 ▸整个服务流程需要8-10周 | ▸质粒 ▸含目的基因的质粒 ▸阳性表达菌株 ▸蛋白（一般为1-3mg，80%纯度，具体视小试结果而定） ▸实验报告 |